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抗体类检测项目

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分子量检测项目

概述

分子量是有机化合物最基本的理化性质参数,正确与否往往代表着所测定的生物大分子的结构是否正确。MALDI-TOF-MS(基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱, 英文名Matrix-Assisted Laser Desorption/ Ionization Time of Flight Mass Spectrometry)是近年来发展起来的一种新型的软电离生物质谱。该方法不产生或产生较少的碎片离子。它可直接应用于混合物的分析,也可用来检测样品中是否含有杂质及杂质的分子量。

分子量也是生物大分子如多肽、蛋白质等鉴定中首要的参数,也是基因工程产品报批的重要数据之一。MALDI-TOF的准确度达0.1%~0.01%(经验值),高于目前常规应用的SDS电泳与高效凝胶色谱技术,是目前表征分析中不可或缺的一门技术。

案例:利拉鲁肽分子量测定

参数:

模式:Reflector positive ms

质量扫描范围:800~4000Da

激光强度:4500

激光打点数量:1200 laser shots

质量误差:100ppm

测试结果: 利拉鲁肽样品(未酶切) 理论分子量[M+H]+:3749.95Da

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概述

相比较于MALDI-TOF,高分辨分子量测试是基于现代高分辨质谱发展的成果上开发而来。前者是对大分子成分激光电离后直接检测质荷比(一般单电荷),而后者是通过ESI电离后检测带多点和的大分子成分,经过去卷积解谱得到精确的分子量。一般而言高分辨分子量的精确度达到几个PPM级别,相较于MALDI-TOF在较大分子量的大分子(比如抗体)检测中更具优势,准确度更高。